产品货号:
BTN90707
中文名称:
天然蛋白提取液
英文名称:
Animal and Plant Total Protein Extraction Solution
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品用于快速提取动物和植物总蛋白,直接用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
保存:室温,有效期1年。其中5×SDS-PAGE上样液需置于-20℃,频繁使用时置于4℃。
本试剂盒一次可以处理100mg左右的动物或植物样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
一、匀浆法
二、直接研磨法
三、液氮研磨法
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- 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。
- 采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。
- 适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。
- 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
组分 | 规格 |
天然蛋白提取液 | 50mL |
5×SDS-PAGE上样液 | 1mL |
保存:室温,有效期1年。其中5×SDS-PAGE上样液需置于-20℃,频繁使用时置于4℃。
本试剂盒一次可以处理100mg左右的动物或植物样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
一、匀浆法
- 对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron剪切式匀浆机匀浆处理。
- 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10~15mL的塑料离心管中。
- 加入1mL动物和植物蛋白释放剂,在冰上用Polytron剪切式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。
- 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
- 4℃ 12000×g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
- 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要立即进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×(加入样品体积的1/4即可,40μL样品加入10μL 5×SDS-PAGE上样缓冲液),在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。
二、直接研磨法
- 可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管匹配的研磨杵。
- 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。
- 加入1mL动物和植物蛋白释放剂,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。
- 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
- 4℃ 12000×g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
- 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要立即进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×(加入样品体积的1/4即可,40μL样品加入10μL 5×SDS-PAGE上样缓冲液),在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。
三、液氮研磨法
- 最好使用玻璃和陶瓷的研钵
- 取大约100mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。
- 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
- 加入1mL动物和植物蛋白释放剂,然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
- 4℃ 12000×g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
- 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要立即进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液使其终浓度为1×(加入样品体积的1/4即可,40μL样品加入10μL 5×SDS-PAGE上样缓冲液),在沸水中水浴5分钟后立即上样电泳。
- 如果4℃ 12000×g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000×g离心10分钟,以去除可见的小碎片。
- 植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙酮或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃ 12000rpm离心10min,弃上清后室温风干3~5分钟,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。
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